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HPLC常見問題及解決方法

更新時(shí)間:2022-11-14 點(diǎn)擊次數(shù):1617

    基線漂移    

01



原因及解決辦法

柱溫波動(dòng):控制好柱子和流動(dòng)相的溫度,檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對(duì)著柱溫箱。

流通池被污染或有氣體:用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池(最好斷開柱子)。如有需要,可以用1N的硝酸(不要用鹽酸)。

紫外燈能量不足:更換新的紫外燈。

流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成:檢查流動(dòng)相的組成,使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級(jí)的溶劑。

流動(dòng)相的pH值沒有調(diào)節(jié)好:加適量的酸或堿調(diào)至最佳pH值。

微信截圖_20221114162435.png

    保留時(shí)間變化    

02


原因及解決辦法

柱溫變化:在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱。

色譜柱沒有平衡好:在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱

柱污染:每天沖洗柱。

柱內(nèi)條件變化:穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動(dòng)相。

柱壽命到:更換色譜柱。

微信截圖_20221114162429.png


    出現(xiàn)拖尾峰    

03



原因及解決辦法

柱超載:降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相。

柱干擾:清潔樣品,調(diào)整流動(dòng)相。

柱效下降:采用較低腐蝕條件,更換柱,采用保護(hù)柱。

柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效:更換燒結(jié)不銹鋼,增加在線過(guò)濾器,過(guò)濾樣品。

柱塌陷或形成短通道:更換色譜柱,采用弱腐蝕條件。

死體積或柱外體積過(guò)大:連接點(diǎn)降至zui低,對(duì)所有連接點(diǎn)做合適調(diào)整,盡可能采用細(xì)內(nèi)徑連接管

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